1. 指的是細胞在體外條件下的生長，在培養(yǎng)的過程中細胞不再形成組織（動物）。培養(yǎng)物是單個細胞或細胞群。細胞在培養(yǎng)時都要生活在人工環(huán)境中，由于環(huán)境的改變，細胞的移動或受一些其他因素的影響，培養(yǎng)時間加長，傳代導(dǎo)致細胞出現(xiàn)單一化型。

1. 細胞類型根據(jù)是否附于支持物上生長的特性，分為貼附型、懸浮型。
2. 貼附型
3. 細胞貼附在支持物表面生長，只依賴貼附才能生長的細胞叫做貼附型細胞(Anchorrage-dependent cells)這種現(xiàn)象與細胞分化有關(guān)。
4. 懸浮型
5. 特點： 不貼附在支持物生長，胞體圓形，在培養(yǎng)液中生長空間大，可長時間的生長，繁殖旺盛便于做細胞代謝研究。S180肉瘤、血液里的白細胞、K562、 HL－60。

1. 培養(yǎng)基
2. 培養(yǎng)基（Medium）是供微生物、植物和動物細胞生長和維持用的人工培植的養(yǎng)料，一般都含有：碳水化合物（糖）、氨基酸、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水。

1. M199 (Medium 199):
2. Medium 199 (Mod), 1X, R10-060-CV
3. 比較古老的，配方復(fù)雜的，含有核苷酸，核酸等成分的培養(yǎng)基。最初用于雞胚肌細胞的培養(yǎng)，還用于各種細胞的維持和病毒生產(chǎn)。
4. RPMI1640 (Roswell Park Memorial Institute # 1640):
5. RPMI 1640， 1X w\L-glut, R10-040-CV
6. RPMI 1641， 1X w\L-glut & HEPES, R10-040-CV
7. 是McCoy’s 5A的的改進版，還有高濃度的肌醇。廣泛用于懸浮細胞的培養(yǎng)。如人類白細胞、骨髓瘤細胞、雜交瘤細胞等血液來源的細胞。
8. Ham’s F12 (Ham’s Nutrient Mixture F12):
9. Ham’s F-12 Medium, w\L-glut, R10-080-CV
10. 含有更多的維生素，肌醇，氨基酸。用于培養(yǎng)大鼠，兔子和雞胚細胞，還用于中國倉鼠卵巢細胞以及肺細胞的培養(yǎng)。

1. ● 干粉：3年
2. ● 液體：12—18個月
3. ● 液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基都必須在2—8℃，避光保存，不能冷凍
4. ● 干粉和液體培養(yǎng)基可在室溫情況下運輸

1. 谷氨酰胺——能量來源
2. L-GLUTAMMINE, powder, R61-030-RM
3. ?L-谷氨酰胺是一種氨基酸，細胞的重要能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。
4. ?L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會自發(fā)降解；降解產(chǎn)物對細胞有毒性（對干細胞、原代細胞影響尤其大）。
5. ?解決方案：
6. √選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基，自己添加
7. √選擇穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物

1. glutaGRO：穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物
2. glutaGRO Supplement, R25-015-CI
3. ?glutaGROTM是由丙氨酸和L-谷氨酰胺縮合形成的二肽，穩(wěn)定性高
4. ?可在室溫下保存，2年穩(wěn)定（谷氨酰胺需冷凍保存），使用更方便
5. ?不易降解，不產(chǎn)生有毒氨，更利于細胞生長。
6. ?Gibco GlutaMAX的完全替代

1. 丙酮酸(Sodium Pyruvate)——能量來源
2. Sodium Pyruvate Solution 100 mM (100X), liquid, R25-000-CI
3. ?丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源
4. ?葡萄糖不足的時候，細胞可以代謝丙酮酸鈉

1. 非必須氨基酸
2. 根據(jù)細胞而定，非必須氨基酸 R25-025-CI
3. 

1. ?平衡鹽溶液主要是由無機鹽、葡萄糖組成；
2. ?它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)；
3. ?用于取材時組織塊的漂洗、細胞的漂洗、配置其他試劑等
4. ● PBS磷酸鹽緩沖液
5. PBS 1X w\o Ca & Mg, R21-040-CV
6. ● DPBS (Dulbecco’s Phosphate-Buffered Salines)
7. DPBS 1X w\o Ca & Mg, R21-031-CV
8. ● Earle’s 平衡鹽
9. ● Hank’s 平衡鹽 (HBSS)
10. HBSS, 1X, w\ Ca &Mg, R21-020-CV

1. 碳酸氫鈉
2. ?多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進行緩沖
3. ?碳酸氫鈉的緩沖需要二氧化碳
4. 高碳酸氫鈉（1.5-3.7g\L）需要5—10% CO2
5. 低碳酸氫鈉（0.35g\L）不需要二氧化碳孵箱
6. ?干粉培養(yǎng)基在配置時單獨添加

1. HEPES
2. HEPES Buffer 1M Soltn, R25-060-CI
3. ?氫離子緩沖劑，其作用不依賴于二氧化碳
4. ?在一定范圍內(nèi)對細胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍，保證細胞的良好生長
5. ?非必需，根據(jù)細胞和實驗要求選擇

1. 血清
2. 血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體
3. ?提供基本營養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無機鹽、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質(zhì)
4. ?提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（氫化可的松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。
5. ?提供結(jié)合蛋白：結(jié)合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質(zhì)，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。
6. ?促進細胞貼壁

1. 胎牛血清（FBS）
2. 康寧cellgro FBS
3. ?澳洲胎牛血清
4. Fetal Bovine Serum, Australia origin R35-076-CV
5. 澳洲——“最干凈的大陸”
6. 高端產(chǎn)品
7. ?南美（烏拉圭）胎牛血清
8. FBS, Uruguay origin, 35-010-CV
9. 中端價格
10. 品質(zhì)保證