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蛋白濃縮神器，看這里！
發布日期：2019-01-25 瀏覽次數：3574
蛋白濃縮神器，看這里！
蛋白濃縮可以說是Western Blot的常規操作，根據樣品規模（體積）、通量（樣品個數）、混合物的復雜程度及相關設備配套要求，就分為鹽析、透析、凍干、分子篩色譜等等不同選擇。
超濾，不論從操作的簡便性還是處理效率來說，都算優勢突出，成為蛋白濃縮/除鹽/緩沖液置換等蛋白綜合處理的首選。
針對蛋白超濾濃縮，默克密理博的超濾管已是各實驗室必備濃縮神器了，小敏本以為大家對它已是再熟悉不過，可萬萬想不到上周竟然有實驗小能手跟小敏抱怨超濾管放到離心機里扣不上蓋子，真是驚出了小敏一身冷汗！
今天小敏不得不趕快科普下超濾管：
Amicon Ultra 超濾管分為四種型號可以處理不同體積大小的樣本，每種型號又分為5種類型濃縮5種不同分子量大小的蛋白，超濾管采用垂直結構的豎膜設計避免堵膜，在短時間內即可完成濃縮、去鹽和換緩沖液；其死體積設計可以防止過度離心而導致樣本過干；反轉離心回收設計保證了最大的回收率。
蛋白如果濃縮過快或者過度濃縮都有可能引起蛋白沉淀，Millipore建議蛋白濃縮后的最終濃度不超過20mg/ml。對于對濃縮速度敏感而容易沉淀的蛋白，建議的改進方法是：
1）離心力降為推薦離心力的30%-50%；
2）改選擇截留分子量更大的過濾裝置（如原本選用10k，此時可以選擇30k）；
3）在濃縮過程中取出超濾管，用槍頭反復吹吸幾次。
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